單細(xì)胞多重蛋白分析系統(tǒng)mWB-X2與其他技術(shù)相比有什么優(yōu)勢(shì)?
單細(xì)胞多重蛋白分析系統(tǒng)mWB-X2采用的是單細(xì)胞western blot技術(shù):是一種測(cè)量單細(xì)胞蛋白表達(dá)的方法,通過電泳分離單細(xì)胞裂解物中的蛋白質(zhì),可使用常規(guī)western 抗體對(duì)細(xì)胞樣品中蛋白質(zhì)表達(dá)的異質(zhì)性進(jìn)行高度特異性的測(cè)量。單細(xì)胞 Western 可以分析分選(FACS 等技術(shù))后的細(xì)胞樣本,并簡(jiǎn)化具有挑戰(zhàn)性的流式細(xì)胞儀分析。
傳統(tǒng)Western blot檢測(cè)方法實(shí)驗(yàn)步驟繁雜、實(shí)驗(yàn)周期較長(zhǎng),非常依靠人工操作,做不到微量細(xì)胞檢測(cè)且實(shí)驗(yàn)結(jié)果平均掩蓋數(shù)據(jù)差異性;RNA-seq技術(shù)是在基因水平直接對(duì)mRNA反轉(zhuǎn)錄出的cDNA片段進(jìn)行高通量測(cè)序,但這并不等同于蛋白水平,決定了其對(duì)單細(xì)胞檢測(cè)的局限性;流式細(xì)胞技術(shù)很多靶蛋白抗體來源受限,并且胞內(nèi)蛋白檢測(cè)操作難度大,需要固定和滲透。
相較而言:
1.單細(xì)胞western技術(shù)操作更簡(jiǎn)單、更快速;
2.可使用常規(guī)western抗體作為免疫探針,抗體選擇面廣;
3.通過溶解細(xì)胞樣本釋放蛋白,能更好地檢測(cè)如轉(zhuǎn)錄因子等具有挑戰(zhàn)性的蛋白質(zhì);
4.除了提供抗體結(jié)合信息外,還提供分子量信息,提高了測(cè)量的特異性;
5.可以多路復(fù)用,同時(shí)檢測(cè)多種蛋白。