產(chǎn)品與解決方案
單細胞多重蛋白分析
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該設備的功能是什么?
定性定量分析單細胞多重蛋白,檢測細胞間不同蛋白的表達。
該設備的原理是什么?可以應用到哪些領域?
單細胞多重蛋白分析系統(tǒng)(mWB-X2)基于單細胞免疫印跡技術,采用特殊設計的可獨立分離收集數(shù)千個單細胞的免疫印跡芯片;細胞經(jīng)原位裂解釋放蛋白,并依照蛋白分子量通過電泳分離,再針對不同蛋白選擇不同熒光染料進行原位免疫學標記,利用熒光掃描儀/共聚焦顯微鏡等采集信號,通過智能軟件快速分析,實現(xiàn)單細胞多重蛋白定性和定量分析,全程耗時僅 4-6 h。 既可以應用于腫瘤、免疫、神經(jīng)、血液等相關的科研和醫(yī)療等領域,用于疾病臨床診斷與治療及感染性疾病、自身免疫性疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、創(chuàng)新藥物研發(fā)等;也可以應用于對痕量、快速、精準檢測有特定要求的司法鑒定等領域。
設備是國產(chǎn)還是進口的?
MONO-X1是唯一一款國產(chǎn)原研、自主可控并且能夠?qū)崿F(xiàn)單細胞多重蛋白定量分析的產(chǎn)品。打破了“卡脖子”技術,自研新型光敏凝膠材料,解決了單細胞免疫印跡技術低豐度蛋白檢測難的挑戰(zhàn)。 進口品牌由于壟斷技術,導致設備溢價高、耗材貴、售后困難,目前僅支付能力較高的客戶有能力購買,甚至出現(xiàn)因耗材試劑昂貴而導致設備采購后閑置的情況。MONO-X1完全自主技術,更低成本、更優(yōu)品質(zhì),適合各類對科研裝備品質(zhì)和投入產(chǎn)出性價比追求的實驗室和研發(fā)企業(yè)。
該設備有應用案例嗎?
有的,我們可以提供幾個應用場景做參考。 (建議直接邀約視頻會議詳細介紹) ① 腫瘤活檢樣本細胞異質(zhì)性研究:我們知道信號通路的失調(diào)以及相同的細胞間變異是癌癥的標志,核酸測量并不直接測量蛋白質(zhì)介導的信號傳導,而大多數(shù)癌癥療法靶向蛋白質(zhì)和腫瘤異質(zhì)性會驅(qū)動藥物反應和耐藥性。利用單細胞蛋白技術可以定量蛋白表達量,分析腫瘤活檢組織腫瘤細胞異質(zhì)性,為細胞異質(zhì)性研究提供新的見解。 ② 細胞轉(zhuǎn)染中單細胞融合蛋白共表達分析研究:快速準確地分析宿主細胞中的外源基因表達對于研究細胞和分子生物學中的基因功能至關重要,但仍然面臨著報告基因和靶基因共表達不完全的挑戰(zhàn)。單細胞多重蛋白分析系統(tǒng)mWB-X2用基于微芯片免疫印跡方法的單細胞轉(zhuǎn)染效率分析芯片,能夠快速準確地分析數(shù)千個宿主細胞個體中外源基因的表達差異,還可以用于稀有細胞 轉(zhuǎn)染效率的分析和轉(zhuǎn)染方法的評估。 ③ 炎癥小體研究實驗:利用單細胞Western技術,檢測炎癥小體相關蛋白的表達,定量單細胞蛋白表達量,鑒定及定量分析炎癥小體相關亞群。 ④ 腫瘤循環(huán)細胞蛋白標志物研究:CTC是罕見的細胞,從腫瘤脫落到循環(huán)中,每7.5毫升血液發(fā)生1-500個細胞,大量的研究集中在通過利用這些癌細胞的獨特特征(例如,表面蛋白表達,大小和可變形性)來分離CTC。然而,盡管CTC枚舉和基因組學提供了見解,但兩種測量都不能完全描述表型,在某些情況下,基因組學/轉(zhuǎn)錄組學與蛋白質(zhì)表達之間的相關性較弱。利用單細胞蛋白技術能夠在單個循環(huán)腫瘤細胞上檢測多種蛋白質(zhì)marker,液體活檢提供更精準的診斷marker。
該設備如何實現(xiàn)對低豐度蛋白質(zhì)的靈敏檢測?
單細胞多重蛋白分析系統(tǒng)mWB-X2的凝膠微孔微陣列芯片是經(jīng)過精密設計的,芯片上覆蓋了一層光敏凝膠,凝膠層有序排列了6000個微孔,微孔可以捕獲單個細胞,實現(xiàn)單細胞分辨率蛋白分析。細胞在微孔中原位裂解釋放蛋白,再通過電泳將不同分子量的蛋白分離到微孔之間的凝膠泳道中,分離出的蛋白在紫外光的照射下會以共價鍵的形式固定到凝膠中,不用轉(zhuǎn)膜等操作,可以直接在芯片上進行抗體孵育,這樣就有效降低了蛋白損失,利于低豐度蛋白的檢測,并且可以洗脫重孵育實現(xiàn)多路復用。 在適當?shù)淖贤夤饧ぐl(fā)下,該新型光敏凝膠材料,30秒的蛋白固定效率可達80%,60秒就能夠達到90%以上,是個非??焖俚姆磻移浔尘盁晒獗容^低,對于抗體孵育后低豐度蛋白的熒光檢測干擾小,所以說這臺設備在檢測靈敏度和低豐度蛋白檢測方面是獨具優(yōu)勢的。
單細胞多重蛋白分析系統(tǒng)mWB-X2與其他技術相比有什么優(yōu)勢?
單細胞多重蛋白分析系統(tǒng)mWB-X2采用的是單細胞western blot技術:是一種測量單細胞蛋白表達的方法,通過電泳分離單細胞裂解物中的蛋白質(zhì),可使用常規(guī)western 抗體對細胞樣品中蛋白質(zhì)表達的異質(zhì)性進行高度特異性的測量。單細胞 Western 可以分析分選(FACS 等技術)后的細胞樣本,并簡化具有挑戰(zhàn)性的流式細胞儀分析。 傳統(tǒng)Western blot檢測方法實驗步驟繁雜、實驗周期較長,非常依靠人工操作,做不到微量細胞檢測且實驗結(jié)果平均掩蓋數(shù)據(jù)差異性;RNA-seq技術是在基因水平直接對mRNA反轉(zhuǎn)錄出的cDNA片段進行高通量測序,但這并不等同于蛋白水平,決定了其對單細胞檢測的局限性;流式細胞技術很多靶蛋白抗體來源受限,并且胞內(nèi)蛋白檢測操作難度大,需要固定和滲透。 相較而言: 1.單細胞western技術操作更簡單、更快速; 2.可使用常規(guī)western抗體作為免疫探針,抗體選擇面廣; 3.通過溶解細胞樣本釋放蛋白,能更好地檢測如轉(zhuǎn)錄因子等具有挑戰(zhàn)性的蛋白質(zhì); 4.除了提供抗體結(jié)合信息外,還提供分子量信息,提高了測量的特異性; 5.可以多路復用,同時檢測多種蛋白。
設備可以檢測幾張芯片?
MONO-X1目前配置的是MONO-X1一體機,單次實驗可以檢測單張芯片。后續(xù)會有多張芯片的機型,可同時進行1-8張芯片檢測,實現(xiàn)高通量自動化。
分析軟件有哪些功能?可以導出數(shù)據(jù)嗎?
MONO-X1用的軟件是針對蛋白分析專門定制的,能夠在復雜樣本中檢測處理熒光蛋白各項數(shù)據(jù),輸出例如散點圖、直方圖等圖表。軟件可以自動識別泳道、自動識別蛋白雜交斑點,支持 TIF 格式文件輸入,支持圖像降噪、圖像增強、圖像分割,支持導出預處理的圖像、編輯后的圖像和數(shù)據(jù)圖表。
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